aDAPI (Powder) 細(xì)胞核探針《促xiao中》

產(chǎn)品標(biāo)簽

DAPI 藍(lán)色細(xì)胞核探針；PI 碘化丙啶；Hoechst 33342；Hoechst 33258；7-AAD；CAS：28718-90-3；

產(chǎn)品信息

溫馨提示：見我司整理的細(xì)胞核（Cell Nuclear）熒光探針產(chǎn)品專題。

產(chǎn)品描述

DAPI，英文全稱4’,6-Diamidino-2’-phenylindole，中文全稱4’,6-聯(lián)脒-2’-苯基吲哚，是一種藍(lán)色熒光染料，選擇性結(jié)合雙鏈DNA的小溝區(qū)（優(yōu)先結(jié)合AT富集的DNA）形成穩(wěn)定的復(fù)合物，產(chǎn)生比DAPI約強(qiáng)20倍的熒光。DAPI的最大激發(fā)/發(fā)射波長為340/488nm，DAPI-DNA復(fù)合物的最大激發(fā)/發(fā)射波長為364/454nm，通常用作熒光顯微術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)和染色體染色的細(xì)胞核復(fù)染劑。由于對DNA的高親和性，DAPI還常常被用在細(xì)胞計數(shù)、凋亡檢測、支原體污染檢測、基于DNA內(nèi)含物的細(xì)胞分選，以及高內(nèi)涵成像分析中的核分割工具。雖然高濃度情況下DAPI能夠進(jìn)入活細(xì)胞，但DAPI不具細(xì)胞膜滲透性，通常情況用來染固定細(xì)胞。對于活細(xì)胞染色，Hoechst 33342（貨號：MX4203-10MG）是一種受歡迎的具細(xì)胞膜滲透性的核復(fù)染劑。

本品為DAPI的二鹽suan鹽（2HCl），粉末形式，易溶于水。用于細(xì)胞核染色時，推薦工作濃度為0.5-10μg/ml。

產(chǎn)品特性

1）CAS NO：28718-90-3

2）英文同義名：DAPI dihydrochloride; 4’,6-Diamidino-2’-phenylindole dihydrochloride; 2-(4-Amidinophenyl)- 6-indolecarbamidine dihydrochloride; 4′,6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochloride;

3）中文同義名：DAPI二鹽suan鹽；4’,6-聯(lián)脒-2’-苯基吲哚二鹽suan鹽；

4）分子式：C16H15N5· 2HCl

5）分子量：350.25

6） 純度：>90% (from N)

7）溶解性：溶于水（1-5mg/ml）

8）Ex/Em：340/488nm（DAPI）；364/454nm（DAPI-DNA）；

9）化學(xué)結(jié)構(gòu)：

保存與運(yùn)輸方法

保存：室溫干燥避光保存，2年有效。

運(yùn)輸：室溫運(yùn)輸。

儲存液配制

用雙蒸水溶解，配制1-5mg/ml的儲存液。-20oC避光保存1年，建議分裝保存，避免反復(fù)凍融。【注意】：本品不可以用緩沖液直接溶解。

使用方法

1. 工作液配制

用雙蒸水或PBS稀釋母液，配制成所需要的工作濃度（0.5-10μg/ml）。

2. 固定的細(xì)胞或組織染色

對于固定的細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的最后進(jìn)行。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行DAPI染色。

2.1 對于貼壁細(xì)胞或組織切片：加入適量DAPI染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細(xì)胞：至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5min。

2.2 吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5min。

2.3 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。Ex/Em=364/454nm。

3. 活的細(xì)胞或組織染色

3.1 細(xì)胞培養(yǎng)物中加入適量DAPI染色液，約1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。對于六孔板，一個孔通常需加入1ml染色液；對于96孔板，一個孔通常需加入100μl染色液。

3.2 在37℃培養(yǎng)細(xì)胞10～20min。

3.3 用PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。

3.4 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。Ex/Em=364/454nm。

注意事項

1）DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當(dāng)防護(hù)。

2）熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測。

3）為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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